一、 實驗目的和原理

測定戊巴比妥鈉（ 57-33-0） 腹腔注射對小鼠催眠作用的 ED50值。 戊巴比妥鈉為巴比妥類鎮靜催眠藥，用適當劑量給小鼠腹腔注射后產生的催眠效應， 常用翻正反射的消失來判斷， 該指標僅有陽性（ 睡眠） 和陰性（ 不睡眠） 兩種現象， 屬于質反應。 質反應量效曲線的橫坐標為對數劑量， 而縱坐標采用陽性反應發生的頻數時， 一般為常態分布曲線。 如改用累加陽性頻數為縱坐標時， 可以得到標準的 S 型曲線。 該曲線的中央部分（ 50%反應處） 接近一條直線， 斜度最大， 其相應的劑量也就是能使群體中半數個體出現某一效應的劑量， 通常稱為半數效應量。 如效應為療效， 則稱半數有效量（ ED50） ； 如效應為死亡， 則稱半數致死量（ LD50） 。 這些數值是評價藥物作用強度和藥物安全性的重要參數。 021-51602548
孫氏改進的 Kaerber 法的設計條件是： 各組實驗動物數相等， 各組劑量呈等比數列， 各組動物的反應率大致符合常態分布。

若以 Xm 為最大反應率組劑量的對數， i 為組間劑量比的對數， p 為各組反應率， Pm 為最高反應率， Pn 為最低反應率， n 為實驗組數， 則：ED50＝ lg-1[Xm－ i（ ∑ P－ 0.5） ＋ i/4（ 1－ Pm－ Pn） ]含 0%及 100%反應率時，ED50＝ lg-1[Xm－ i（ ∑ P－ 0.5） ]ED50的 95％ 可信限＝ lg-1（ lgED50± 1.96· S）其中 S＝ i

二、 實驗材料

小鼠 50 只， 1% 戊巴比妥鈉（ sodium pentobarbital solution） 小鼠籠， 天平， 0.5ml 或 0.25ml 注射器。

三、 實驗步驟

1、確定給藥劑量：先以少量動物做預實驗，以獲得小鼠對戊巴比妥鈉催眠反應率為 100％ 的最小劑量（ ED100）
和反應率為 0％ 的最大劑量（ ED0） 。 然后在此劑量范圍內， 按等比數列分成幾個劑量組（ 一般 4～ 8 組） ，
各組劑量的公比（ r） 為 r＝ n-1√ ED100/ED0
求得 r 后， 自第一劑量組（ ED0） 開始乘以 r， 可得相鄰的下一個組的劑量。 若共分為 5 個組， 各組劑量分
別為 ED0、 r· ED0、 r2· ED0、 r3· ED0、 r4· ED0、 r5· ED0。
2、 給藥： 取體重 25g 左右的健康小鼠 50 只， 查隨機數字表， 隨機分為 5 個組， 每組 8 只(除去極端重量小
鼠 2 只)。 按表 1 所列的各組給藥濃度分別腹腔注射 0.1ml/10g。
3、 記錄結果： 以翻正反射消失為入睡指標， 觀察藥物的催眠效應， 記錄各組腹腔注射后 15min 內睡眠鼠數，
填入表 1。

四、 實驗結果

表 1 計算戊巴比妥鈉 ED50用表

根據表 1 的數據和上述公式可求得 ED50=31.90

注意事項

1、 為減少誤差， 由 1 人配藥
2、 保持環境安靜
3、 如果第一組出現陽性動物， 則向下按公比增加一個低劑量組(d0=d1/r)
4、 最后一組動物未全部陽性， 向上增加一個劑量(dk+1=dkr)

實驗動物的麻醉方法，除了使用戊巴比妥鈉進行注射麻醉，還可以選擇使用異氟烷氣體麻醉：

小動物氣體麻醉機

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