中文字幕在线中字日韩_成人激情站_a√在线观看_狠狠操综合_精品国产一二三_久久五月精品中文字幕

English | 中文版 | 手機(jī)版 企業(yè)登錄 | 個(gè)人登錄 | 郵件訂閱
當(dāng)前位置 > 首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)步驟及操作方法

瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)步驟及操作方法

瀏覽次數(shù):10865 發(fā)布日期:2021-9-2  來源:http://www.bioalpha2008.com/

瓊脂糖凝膠電泳是鑒定核酸、蛋白分子量的常用方法,通過瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)分析,可以有效地識(shí)別出核酸類型及DNA片段的大小。

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
1、瓊脂糖凝膠:瓊脂糖凝膠的配置濃度需要根據(jù)DNA片段長(zhǎng)度的大小而定。具體的瓊脂糖凝膠的配置濃度參考范圍如下:

 


2、緩沖液:核酸的電泳緩沖液主要有有 Tris-硼酸(TBE)、Tris-乙酸(TAE)和Tris-磷酸(TPE) 3種。實(shí)驗(yàn)中多選用TBE緩沖液,如果考慮成本因素的話也可以嘗試使用TAE緩沖液。TPE緩沖液磷酸鹽濃度較高,在進(jìn)行DNA回收時(shí)容易形成沉淀。10XTBE緩沖液可以直接購(gòu)買,也可以自行配制。
10XTBE緩沖液配制方法如下:
Tris:108克
EDTA: 9.3克
硼酸:55克
加純水到1000ul (PH為8.0~8.2之間) ,使用時(shí)用20倍的水稀釋到0.5XTBE即可。


3、指示劑的使用
指示劑:在DNA電泳實(shí)驗(yàn)中常用的指示劑主要為溴二甲苯酚藍(lán)和二甲苯青等。堿性環(huán)境下的溴二甲苯酚藍(lán)呈現(xiàn)紫藍(lán)色,在不同濃度的瓊脂糖凝膠中的遷移速率也不相同。比如:在0.6%濃度的凝膠中的遷移率與1KB長(zhǎng)度的DNA片段基本一致。而在1%左右濃度的瓊脂糖凝膠中遷移速率與0.6KB長(zhǎng)度的雙鏈DNA片段基本一致。
二甲苯青溶于水呈現(xiàn)藍(lán)色,同樣在濃度不同的凝膠中二甲苯青的遷移速率也是不相同的,比如在1%瓊脂糖凝膠電泳時(shí),其遷移速率大致與2Kb雙鏈DNA接近。

4、染色劑的使用
染色劑:核酸電泳后,需經(jīng)染色后才能顯現(xiàn)出帶型,瓊脂糖凝膠實(shí)驗(yàn)較為常用的是EB染色,也就是溴化乙錠染色法。根據(jù)實(shí)際實(shí)驗(yàn)情況,可在凝膠電泳緩沖液中加入濃度為0.5ug/ml的溴化乙錠,或電泳后將凝膠置入濃度為0.5ug/ml EB溶液中染色10-15分鐘。即可看到條帶。值的注意的是EB濃度如果過高會(huì)影響到條帶的清晰度。


5、核酸電泳設(shè)備
核酸電泳設(shè)備主要包括電泳儀、電泳槽、梳子等。


6.核酸電泳方法
(1)在用純水清洗過的電泳槽里放置好梳子。
(2)將稀釋好的0.5xTBE緩沖液加入三角瓶中,并加入定量的瓊脂粉,根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求配置好對(duì)應(yīng)的瓊脂糖凝膠。待冷卻到60°C時(shí)即可加入EB。緩慢倒入電泳槽中凝固。
(3)待膠凝固后,箱電泳槽中緩緩加入0.5XBE濃度的TBE,加入量以淹沒膠面2MM為宜。
(4)打開電源,進(jìn)行電泳操作。
(5)根據(jù)電泳條帶進(jìn)行電泳分析比對(duì)。

發(fā)布者:蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司
聯(lián)系電話:0512-62956104
E-mail:jie_wu@bioalpha.cn

用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊(cè) 忘記密碼
評(píng)論只代表網(wǎng)友觀點(diǎn),不代表本站觀點(diǎn)。 請(qǐng)輸入驗(yàn)證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網(wǎng) 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
主站蜘蛛池模板: 国产精品高潮久久久久 | 国产91精品麻豆 | 免费视频a级毛片免费视频 曰韩少妇内射免费播放 | 亚洲国产综合专区在线播放 | 娇喘抽搐高潮喷水A片免费观看 | 国产成人av一区二区三区 | jizz成熟丰满韩国女视频 | 亚洲精品视频在线免费播放 | 国产欧美日韩亚洲另类第一第二页 | 精品999www| 国产精品又又酱在线午夜 | 欧美精品综合A片在线观看 区一区二在线观看 | 久久精品国产99国产毛片 | 中文字幕在线轮第一页 | 波多野结衣高清无码视频 | 国产欧美在线亚洲一区 | 久一视频在线 | 法国淫欲的代价2 | 美女脱精光隐私扒开免费观看野外 | 秋霞鲁丝片一区二区三区 | 插鸡网站在线播放免费观看 | 国产911| 77中文字幕| 99久久免费国产精品热 | 午夜片神马影院福利 | 中文字幕一区二区三区久久 | 九九99九九精彩4 | 未满十八岁禁止在线观看 | 精品三级av在线导航 | 欧美日产一区二区三区在线观看 | 特写高潮汇编hd18 | 亚洲日本无码一区二区三区 | 亚洲人成绝费网站色WWW吃脚 | 水蜜桃无码视频在线观看 | 日韩欧美一区二区三区在线视频 | 日本国产高清不卡 | 成人深夜在线 | 中文字幕乱码亚洲无线码三区 | 久久久久久久久女人体 | 久久久久久久av麻豆果冻 | 在线亚洲综合 |