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生物發(fā)光成像技術(shù)中三大生物發(fā)光體系的應(yīng)用適配性介紹

瀏覽次數(shù):255 發(fā)布日期:2025-5-15  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
生物發(fā)光成像(BLI)技術(shù)在疾病模型研究中具有重要價值,但其性能高度依賴于酶-底物體系的特性。本文基于實驗數(shù)據(jù),對比 FLuc/D-熒光素鉀鹽體系、AkaLuc/Akalumine鹽酸鹽體系、 NanoLuc/HFFz 體系這三種體系的表層、深層組織穿透性及病灶定位能力,為不同實驗場景提供選型依據(jù)。

體外靈敏度與檢測極限
在體外梯度稀釋實驗中, NanoLuc/HFFz 體系在 10 個細(xì)胞時仍可檢測到穩(wěn)定信號,而 FLuc/D-熒光素鉀鹽體系、AkaLuc/Akalumine 鹽酸鹽體系在此條件下信號均低于檢測閾值。

FLuc/D-熒光素鉀鹽體系:
傳統(tǒng)高負(fù)荷檢測
適用場景:體外大規(guī)模細(xì)胞實驗(如藥物篩選、腫瘤球生長監(jiān)測)短期淺表組織成像(如皮下移植瘤體積追蹤)。

AkaLuc/Akalumine鹽酸鹽體系:
穿透性增強的中等靈敏度系統(tǒng)

核心價值:改良底物結(jié)構(gòu)提升組織穿透性,適用于中深層組織動態(tài)監(jiān)測(如肌肉內(nèi)炎癥模型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)。

NanoLuc/HFFz體系:
單細(xì)胞級檢測的革命性突破

技術(shù)優(yōu)勢:支持極低細(xì)胞量研究(如循環(huán)腫瘤細(xì)胞捕獲、早期微轉(zhuǎn)移灶定位),低底物負(fù)荷減少代謝毒性,適合長期實驗(如慢性疾病模型)。

 
FLuc/D-熒光素鉀鹽體系、 AkaLuc/Akalumine鹽酸鹽體系、 NanoLuc/HFFz體系在細(xì)胞水平上的發(fā)光檢測圖
圖使用博鷺騰 Aniview 全光譜動物活體成像系統(tǒng)拍攝

在體內(nèi)不同位置比較實驗
●  FLuc/D-熒光素鉀鹽體系
受限于組織穿透力,僅推薦用于淺表或高細(xì)胞密度區(qū)域(如皮下腫瘤短期監(jiān)測)。
●  AkaLuc/Akalumine 鹽酸鹽體系
在表層及深層組織(如大腦、肺部)中信號最強,其底物分子量小、脂溶性高的特性可能優(yōu)化了血腦屏障穿透。憑借其穿透性優(yōu)勢適合急性期監(jiān)測,可快速捕捉病灶(如腦轉(zhuǎn)移瘤短期治療響應(yīng))。
●  NanoLuc/HFFz 體系
雖然信號強度比 AkaLuc/Akalumine 鹽酸鹽體系的低,但以極低濃度實現(xiàn)有效檢測,并且也能夠進(jìn)行血腦屏障穿透,其以低毒性實現(xiàn)持續(xù)信號,在長期毒性敏感實驗(如腦轉(zhuǎn)移慢性模型)中更具安全性優(yōu)勢。

 
 
FLuc/D-熒光素鉀鹽體系、 AkaLuc/Akalumine鹽酸鹽體系、 NanoLuc/HFFz體系在體內(nèi)發(fā)光檢測圖
圖使用博鷺騰 Aniview 全光譜動物活體成像系統(tǒng)拍攝

HFFz 發(fā)光底物體外極限細(xì)胞數(shù)量信號對比

 
B16F10-NanoLuc細(xì)胞-HFFz底物發(fā)光檢測圖
圖使用博鷺騰 Aniview 全光譜動物活體成像系統(tǒng)拍攝
 
B16F10-NanoLuc細(xì)胞-HFFz底物發(fā)光檢測統(tǒng)計圖(每個數(shù)據(jù)均進(jìn)行三個重復(fù))
 
成本-效益比
本實驗中 FLuc/D-熒光素鉀鹽體系試劑成本最低,但靈敏度局限;NanoLuc/HFFz 體系單次檢測成本高于 AkaLuc/Akalumine 鹽酸鹽體系,但超微檢測需求可減少實驗動物使用量。
 
多層次技術(shù)矩陣
FLuc/D-熒光素鉀鹽體系、 AkaLuc/Akalumine 鹽酸鹽體系、 NanoLuc/HFFz 體系形成多層次技術(shù)矩陣:
FLuc/D-熒光素鉀鹽體系憑借成本與穩(wěn)定性,仍是高通量篩選的“基礎(chǔ)支柱”;
AkaLuc/Akalumine 鹽酸鹽體系填補深層組織實時成像空白,成為急性期研究的“透視眼”;
NanoLuc/HFFz 體系突破靈敏度極限,為精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)提供單細(xì)胞級“顯微鏡”。
研究者需根據(jù)目標(biāo)組織的解剖特性、檢測持續(xù)性和毒性耐受閾值進(jìn)行準(zhǔn)確匹配,必要時通過多體系聯(lián)用實現(xiàn)實驗設(shè)計的最優(yōu)化。
例如用 AkaLuc/Akalumine 鹽酸鹽體系定位轉(zhuǎn)移灶后,切換 NanoLuc/HFFz 體系進(jìn)行長期微殘留監(jiān)測,實現(xiàn)實驗設(shè)計的精細(xì)化升級。

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