《小蟲子，哪里跑！》——疾控中心寄生蟲病實驗室檢驗方案介紹
2024年4月，為了落實《“健康中國2030”規(guī)劃綱要》提出的“全國所有流行縣基本控制包蟲病等重點寄生蟲病流行”防治目標，全面推進重點寄生蟲病的控制與消除進程，減少寄生蟲病危害，保障群眾健康，國家疾控局等15個部門制定了《全國包蟲病等重點寄生蟲病綜合防治實施方案（2024—2030年）》并印發(fā)給各相關政府單位。
在疾病預防控制體系中，疾控中心寄生蟲病實驗室占據(jù)著極為重要的地位，肩負著多項重要職責，不僅要為制定和完善寄生蟲病相關的法律法規(guī)、政策、標準等提供堅實的技術支撐，還要承擔全國寄生蟲病預防控制工作的業(yè)務指導任務，此外，還需負責寄生蟲病的應急處置、科學研究、國際合作等諸多事務。它就像是一個精密的 “偵察站”，專注于寄生蟲病的監(jiān)測、預防與控制，為守護公眾健康筑起一道堅固的防線。

寄生蟲病實驗室檢測方法：
寄生蟲病的實驗室檢查包括病原學檢查、免疫學檢查和分子生物學檢查。

病原學檢查
病原學檢查時指通過采集患者的血液、組織液、組織、糞便等標本，用過顯微鏡等直接觀察，或在處理、染色后觀察，以發(fā)現(xiàn)寄生蟲蟲體或蟲卵作為診斷依據(jù)，有時候還需要進行寄生蟲那個體外培養(yǎng)或動物接種后再進行病原學檢查。
 
1.1直接觀察法
薄血膜法 制涂片后使用姬薩姆染色或瑞氏染色等方法染色后，行顯微鏡檢查；常用于檢查血液內(nèi)的瘧原蟲、微絲蚴、錐蟲、弓形蟲、巴貝西蟲等。
厚血膜法 制厚血膜后片，干燥后用蒸餾水溶血，再干燥后染色進行鏡檢。
組織取材檢查 收集患者的組織樣本，將高度懷疑含有寄生蟲的病例組織送至病理科進行鑒別診斷，通常用蘇木精-伊紅染色檢查寄生蟲。本法可用于旋毛蟲、盤尾絲蟲、羅阿絲蟲及其他蟲體的檢查。
糞便0.9%氯化鈉溶液直接涂片法 制片后直接置于顯微鏡下觀察，本法主要應用于檢測大鼠、小鼠、豚鼠等實驗動物腸道鞭毛蟲和纖毛蟲。
糞便直接涂片染色法 本法主要為碘液染色。涂薄樣品蓋片后直接在顯微鏡下觀察。此法常用于犬、猴溶組織內(nèi)阿米巴包囊等原蟲包囊的檢測，顯微鏡下發(fā)現(xiàn)包囊即為陽性。
糞便厚涂片法 使用世衛(wèi)組織推薦的改良加藤法（Kato-Katz厚涂片法）蟲卵計數(shù)進行鏡下定量檢測。該方法適用于多蠕蟲卵的定量檢測。

蟲卵濃集法
1.2.1 重力沉淀法 利用各種蠕蟲卵和原蟲包囊比重大于水兒自然沉降的原理達到富集目的。最終取沉渣樣本進行鏡檢。
1.2.2 醛醚沉淀法 樣品加醛醚制樣后離心分層樣本，取細渣層鏡檢（查包囊是加一滴碘液）。
1.2.3 碘醛液離心沉淀法 配置MIF液和盧戈碘液后制樣，離心分層取沉淀層進行鏡檢。此法適用于檢查蠕蟲卵、原蟲包囊、滋養(yǎng)體。
1.3 蟲卵漂浮法（一個中類在文章頁面中單獨弄一個框，文字內(nèi)容在框里上下滑動，不要平鋪出來）
1.3.1 飽和氯化鈉溶液漂浮法 制樣后鏡檢
1.3.2 硫酸鋅離心漂浮法 取樣制樣后離心分層，取表層液膜2~3次，置于載玻片上鏡檢。
1.3.3 蔗糖離心浮聚法 取樣過濾離心，參照飽和氯化鈉溶液漂浮法，取載玻片表面膜鏡檢。適用于檢查糞便中隱孢子蟲卵囊。
1.3.4 氯化鋅溶液漂浮法 樣品加入氯化鋅溶液混勻，離心靜置后取上層清液制片鏡檢。此法適用于犬、貓等動物細粒棘球絳蟲的檢測。
1.4 幼蟲孵化法
毛蚴孵化法、常規(guī)沉孵法、棉析毛蚴孵化法、鉤蚴培養(yǎng)法
1.5 肛門拭子法  
2.免疫學檢查
2.1 側(cè)流免疫層析檢測（lateral flow immunochromatographic assay, LFIA） （一個中類在文章頁面中單獨弄一個框，文字內(nèi)容在框里上下滑動，不要平鋪出來）
2.2 免疫熒光檢測 免疫熒光檢測是結(jié)合免疫學技術和熒光染色方法的檢測方法，包括間接免疫熒光技術（IFA）、時間分辨熒光免疫分析法（TRFIA）和補體法。檢測原理是用已標記了熒光素的熒光抗體或抗原作為探針，與組織或細胞標本內(nèi)相應的抗原或抗體結(jié)合成的抗原-抗體復合物，可在熒光顯微鏡下進行肉眼觀察，標本中受激發(fā)光照射而發(fā)出的熒光還可以被定量檢測。作為一種成熟的方法，免疫熒光檢測具有可靠、快速、靈敏、適應性好等有點，常用于臨床寄生蟲病的診斷、流行病學調(diào)查和治療后的復查，目前弓形蟲病等許多人體寄生蟲病均已用免疫熒光檢測進行常規(guī)臨床診斷。
2.3 免疫磁珠酶聯(lián)免疫分析法 常作為大型全自動免疫分析儀的檢測方法，但是需要較完善的實驗室環(huán)境。
2.4 免疫傳感器技術 生物傳感器借住固定化的生物識別分子和能量轉(zhuǎn)換器，將生化信號轉(zhuǎn)化為電信號，可達到直接檢測的目的。此種方法需要比較昂貴的儀器來輔助，目前僅適用于實驗室檢查。
2.5 酶聯(lián)免疫吸附試驗   
3 分子生物學檢查
目前，聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction, PCR）技術已有了長足的發(fā)展，成為分子生物學領域最常用的方法之一。
3.1 PCR技術
3.2 等溫擴增技術
各種寄生蟲檢驗方法方法聯(lián)合狙擊，共筑防檢寄生蟲病的健康長城，各自在寄生蟲病的診斷中發(fā)揮著重要作用。
因此，為了高效完成各項工作任務，疾控中心寄生蟲病實驗室配備了多種先進的儀器設備。其中，顯微鏡作為實驗室的經(jīng)典設備，在寄生蟲檢測中發(fā)揮著不可替代的作用。生物顯微鏡可以幫助工作人員在高倍觀察下，清晰地看到寄生蟲的微觀形態(tài)，如蟲卵的大小、形狀、顏色以及內(nèi)部結(jié)構等細節(jié)特征，為鑒定寄生蟲種類提供直接證據(jù)。而且，一些配備了偏光附件的生物顯微鏡，能更好地觀察具有晶體結(jié)構的寄生蟲成分，提升檢測的準確性。除了顯微鏡，實驗室還擁有離心機、PCR 擴增儀、核酸測序儀等一系列設備，它們相互配合，全方位保障寄生蟲病檢測與研究工作的順利開展。
MSHOT明美顯微鏡能夠在顯微鏡端提供完整的設備解決方案，能夠助力疾控寄生蟲病實驗室高效精準的開展試驗。
正置生物顯微鏡，可以提供良好的明場觀察效果，根據(jù)不用的樣本可以匹配不同型號的顯微鏡，可選ML11 / ML31 / ML45 / ML51-N。
生物顯微鏡ML51-N：40X-1000X放大，高數(shù)值孔徑半復物鏡，成像銳利；編碼式5孔物鏡轉(zhuǎn)盤，1μm超微調(diào)焦精度，適合精細觀察；10X/23mm大視野目鏡，樣本覆蓋更廣
數(shù)智化生物顯微鏡ML45:放大40X-1000X，編碼式物鏡轉(zhuǎn)盤，亮度記憶，LED數(shù)顯屏，顯示當前工作狀態(tài)，ECO人走燈滅，可升級相差，暗場，簡易偏光和熒光觀察
生物顯微鏡ML31:無限遠光學系統(tǒng)，40x-1000X放大，平場消色差物鏡，可升級相差，暗場，簡易偏光和熒光觀察

 
體視顯微鏡MZ62/MZX100搭配斜射光透射底座方案，適合看到透明度高的寄生蟲樣品如蛔蟲、鉤蟲等。
體視熒光顯微鏡MZX100：大變倍范圍的無限遠光學體視熒光顯微鏡，采用優(yōu)質(zhì)的伽利略平行雙光路設計，分辨率高色彩真實，有豐富的配件選項，變倍比高達1:10。
體式顯微鏡MZ62:符合人體工程學設計;可相機鏡下同步觀察，無需來回切換;靈活適配不同大小樣品；標配22mm大視場目鏡，鏡下視野平展寬廣減少眼睛疲勞;高眼點設計，無需摘眼鏡也可觀察;屈光度可調(diào)，保證雙目鏡下同步清晰。

正置熒光顯微鏡MF43-N / MF31 ，搭配長壽命LED光源模組，成像清晰銳利，適合進行樣本的熒光觀察：
研究級正置熒光顯微鏡MF43-N： 研究級正置熒光顯微鏡MF43-N配備6孔落射熒光模塊和超長壽命LED熒光光源，可擴展升級實現(xiàn)各種觀察方式，高數(shù)值孔徑半復消色差物鏡成像清晰，尤其適合免疫熒光、FISH熒光原位雜交等應用。
正置熒光顯微鏡MF31:正置熒光顯微鏡MF31采用無限遠平場消色差物鏡和大視野目鏡，可用雙目或三目觀察，搭配LED熒光激發(fā)裝置，實現(xiàn)明場和熒光顯微觀察。


 
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*本文部分內(nèi)容參考[1]蔡祺,王劍飚.寄生蟲病的實驗室檢查方法[J].檢驗醫(yī)學,2021,36(10):1001-1007+992.侵刪。