鬼筆環肽(Phalloidin)的生物學特性及在細胞骨架研究中的應用
瀏覽次數:265 發布日期:2025-5-27
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AAT Bioquest鬼筆環肽(Phalloidin)是一種從毒蘑菇(如鵝膏菌屬)中提取的環肽毒素,因其獨特的生物學特性,在生命科學研究中具有重要應用。
1. 高特異性結合F-肌動蛋白
靶向性強:選擇性結合細胞骨架中的F-肌動蛋白(微絲),幾乎不與其他蛋白相互作用,背景干擾極低。
穩定結構:與肌動蛋白結合后,可防止其解聚,維持細胞骨架形態,便于長期觀察。
2. 卓越的標記能力
熒光標記兼容性:常與熒光染料(如FITC、TRITC、Alexa Fluor系列)偶聯,實現高分辨率顯微成像(共聚焦、超分辨顯微鏡等)。
低濃度有效:納摩爾級濃度即可清晰標記,減少對細胞活性的影響。
3. 保持細胞活性(活細胞成像)
穿透性改良衍生物:如BODIPY-鬼筆環肽,可通過細胞膜進入活細胞,實現實時動態觀察(需優化條件)。
固定細胞首選:對固定后的細胞滲透性極佳,是免疫熒光共定位的理想選擇。
4. 高穩定性和信噪比
抗光漂白:部分衍生物(如Alexa Fluor偶聯物)耐光性強,適合長時間拍攝。
低背景噪聲:特異性結合減少非特異性信號,提升圖像質量。
5. 廣泛應用場景
細胞形態學研究:清晰顯示微絲分布(如偽足、應力纖維)。
疾病機制:研究癌癥遷移、神經突觸可塑性等。
藥物篩選:評估化合物對細胞骨架的影響。
6. 與其他技術的兼容性
可與抗體標記(如微管蛋白、細胞器標記)聯合使用,實現多色成像。
適用于3D細胞培養、組織切片等多種樣本類型。
注意事項
毒性:天然鬼筆環肽劇毒,需謹慎操作;熒光衍生物毒性較低。
活細胞應用限制:需選擇透膜性衍生物,并優化實驗條件。
圖1.Phalloidin-iFluor®488 Conjugate在熒光顯微鏡下使用FITC濾鏡(綠色)染色HeLa細胞的熒光圖像。將細胞固定在4%甲醛中,用線粒體染料MitoLite™Red FX600 (Cat#2677,紅色)和Nuclear Blue™DCS1 (Cat#17548,藍色)共同標記。
圖2.用 4%甲醛固定 HeLa 細胞,接著用 Cell Navigator® F-肌動蛋白標記試劑盒(紅色熒光)在 Costar 黑色 96 孔板中進行染色的熒光圖像。細胞分別用鬼筆環肽-iFluor® 594(貨號 23122,紅色)和細胞核染色劑 DAPI(貨號 17507,藍色)進行標記。在固定前,細胞內質網(ER)用 ER Green™(貨號 22635,綠色)進行染色。
AAT Bioquest鬼筆環肽憑借其高特異性、穩定標記能力和廣泛適用性,成為細胞骨架研究中的“金標準”工具,尤其在熒光顯微技術中不可或缺。