養(yǎng)過支原體的都知道,其實支原體入門難,熟練容易,精通難。培養(yǎng)基不出錯,操作嚴(yán)格按照sop不去偷懶私自自我創(chuàng)造就都可以養(yǎng)出來。
回到問題,口腔支原體屬于比肺炎難養(yǎng)一些的支原體,原因主要在口腔支原體本身的特點:
詳解:
血清是否使用了劣質(zhì)血清,國產(chǎn)血清或者新生牛血清,血清對支原體生長有很明確的作用,在肺炎支原體的培養(yǎng)中,在使用了澳洲新生牛血清對比澳洲胎牛的情況下,會出現(xiàn)至少CFU 30%的差距,而口腔的情況則會出現(xiàn)生長衰弱甚至長期不生長。如果想要彌補血清的差距可以通過添加幾種生長因子進(jìn)行一定程度的補救。
干粉的配方不科學(xué)或者原材料使用便宜國產(chǎn)貨。23714在營養(yǎng)需求方面存在更苛刻,對優(yōu)質(zhì)動物蛋白、脂類等存在大量需求,如果配方使用大量植物性蛋白一定會對支原體生長有影響(請參考支原體發(fā)生的原生環(huán)境——讓吃肉的去吃豆子,身體好的還可以湊合,身體差的直接最后一代)。國產(chǎn)培養(yǎng)基在細(xì)菌領(lǐng)域的差距較小主要在大部分細(xì)菌更皮實且大部分常規(guī)CP細(xì)菌為常見環(huán)境中就有的,因此,國產(chǎn)使用廉價原料影響微乎其微,但是支原體的情況就會出現(xiàn)某些差距,而這些差距就會在口腔、豬鼻以及滑液支原體中直接以不生長的形式體現(xiàn)。
國產(chǎn)培養(yǎng)基由于含有氨基酸成分在,因此后期會因為氨基酸降解而出現(xiàn)液體培養(yǎng)基變紅的情況,而且部分氨基酸的在熱狀態(tài)下極不穩(wěn)定,因此會出現(xiàn)在短期就降解的速度遠(yuǎn)大于口腔吸收的速度,結(jié)果就是口腔在液體培養(yǎng)基中還沒怎么生長,結(jié)果氨基酸就差不多分解完,并且液體也變紅了,那么在接下來傳代的過程中的10ml提取1ml接種新培養(yǎng)基就會變成變相稀釋(如果新液體培養(yǎng)基與老培養(yǎng)基同期配置也有氨基酸選擇不當(dāng)?shù)那闆r,那么新培養(yǎng)基的氨基酸含量也岌岌可危),因此請不要因為以往培養(yǎng)細(xì)菌可以使用廉價培養(yǎng)基,也認(rèn)為同是微生物的支原體也可以廉價培養(yǎng)基湊合。
大部分支原體適合搖瓶增菌(效果比靜止更好),但口腔更適合有落腳點的地方培養(yǎng),所以,口腔在剛接種液體培養(yǎng)基的時候請抑制住躁動的心,不要動手拿進(jìn)拿出,想要觀察可以通過放置陰性對照的顏色對比。