Fig1：玻連蛋白涂層提高iPS細胞衍生效率

研究小組最驚訝的是人類iPS細胞生長不需要許多早期認為必須的營養(yǎng)物質(zhì)，但是Vitronectin蛋白的添加卻是必須的。與傳統(tǒng)的培養(yǎng)基相比，加入Vitronectin蛋白可以顯著提高iPSC細胞的生長速率和維持多能性的能力，這對于后續(xù)臨床上的操作利用具有重要意義。在此基礎(chǔ)上來自我國的科研小組在實驗中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)iPS細胞在涂有vitronectin蛋白的基質(zhì)上培養(yǎng)時，這些細胞更容易分化為血細胞。這引起了研究小組成員極大的研究興趣，希望從分子水平探究這背后的作用機制。在實驗中，研究人員通過添加不同濃度的Vitronectin蛋白，觀察iPS細胞分化情況，并利用流式細胞術(shù)和免疫熒光染色等技術(shù)對分化細胞進行鑒定。

Fig2：玻連蛋白促進iPS細胞早期造血

實驗結(jié)果顯示添加vitronectin蛋白在第4天和第6天有效地促進了內(nèi)皮樣細胞的分化和增殖，可以清楚地觀察到具有圓形形狀的造血樣細胞和經(jīng)歷 EHT 的內(nèi)皮樣細胞【2】。科學(xué)家想到αvβ3 和 αvβ5 可以整聯(lián)蛋白在血管生成中介導(dǎo)Vitronectin蛋白功能【3】。整合素是一種細胞表面受體，能夠?qū)⒓毎�與其外界環(huán)境連接起來，并參與細胞的遷移、增殖、分化等過程。αvβ3和αvβ5整合素能夠與Vitronectin蛋白結(jié)合，并通過激活信號通路來促進干細胞向造血細胞系分化。進一步使用RNA干擾技術(shù)進行實驗發(fā)現(xiàn)，αvβ3和αvβ5整合素可能是通過激活Focal adhesion kinase (FAK)和Phosphatidylinositol-3-kinase (PI3K)信號通路來促進造血系細胞的分化。除了在干細胞分化中的重要作用外，Vitronectin蛋白還可以影響干細胞的遷移和增殖。研究表明，Vitronectin蛋白可以促進干細胞的遷移，并且這種效應(yīng)與αvβ3和αvβ5整合素的表達水平相關(guān)；另外，Vitronectin蛋白能夠促進干細胞的增殖，這種效應(yīng)可能與Vitronectin蛋白與另一種整合素αvβ1的結(jié)合有關(guān)【4】。

Vitronectin蛋白在iPSC細胞的培養(yǎng)和應(yīng)用中具有重要意義。作為一種高效、可靠的細胞培養(yǎng)試劑，Vitronectin蛋白可以顯著提高iPS細胞的生長和增殖速率，并促進其向特定細胞系的分化，在最大程度上為iPS細胞研究和應(yīng)用開辟新的道路。Vitronectin蛋白和iPS細胞的組合在干細胞治療和再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域已經(jīng)嶄露頭角，這樣的黃金拍檔將在未來給我們帶來更多的驚喜和沖擊。

同立海源Vitronectin蛋白
目前市場上能夠提供Vitronectin蛋白的廠家還很少，提供定量標(biāo)準(zhǔn)的也只有進口廠家，且定量方法并非基于iPSC，而Vitronectin與其他常用細胞因子不同，目前暫無國際標(biāo)準(zhǔn)品可作為定量標(biāo)準(zhǔn)，這對用戶來說需要花費大量時間和經(jīng)濟成本進行測試，確定實際用量濃度。同立海源可提供全長序列的Vitronectin蛋白（貨號：GMP-TL651），并在iPSC應(yīng)用方面成功建立了定量測活方法，可提供每批次確定的ED50值，方便iPSC客戶的研究應(yīng)用。從數(shù)據(jù)結(jié)果來看，同立海源的Vitronectin蛋白可有效促進iPSC的貼壁及擴增，多批次產(chǎn)品間的ED50值穩(wěn)定，iPSC的貼壁效果（ED90更高）優(yōu)于競品。

N0.1 活性測試 Activity testing

圖1：Vitronectin蛋白活性定量實驗