細胞培養是每個實驗人員都會使用的技術，其準確性和可重復性對于實驗結果的可靠性至關重要。然而，支原體污染作為一種常見且隱蔽的威脅，對細胞培養的影響不容忽視。

支原體是什么？

支原體是目前已知一類能在無生命培養基上生長繁殖的最小的原核細胞微生物，無細胞壁，直徑為0.1-0.3μm，且形態易變，極易通過除菌過濾器。大部分支原體繁殖速度比細菌慢，細胞培養過程中遇到的支原體95%都來自于以下四種支原體：口腔支原體、精氨酸支原體、豬鼻支原體、萊氏無膽甾支原體，其中萊氏無膽甾支原體為牛源性。

采用常規的顯微鏡無法直接觀察到支原體，當細胞（特別是傳代細胞）被支原體污染后，細胞內的DNA、RNA及蛋白表達發生改變，而細胞的生長率一般并未發生顯著的影響，因而細胞被支原體污染一般難以察覺。因此細胞都需要定期（如每個月）進行支原體污染的檢測。

支原體對細胞培養的危害：

1. 細胞生長抑制
支原體通過與細胞競爭營養資源、產生毒素或干擾細胞信號傳導，顯著抑制細胞的生長速率和增殖能力。這導致實驗所需細胞數量不足或細胞狀態不佳，影響實驗的進行和結果的準確性。

2. 基因表達異常
支原體感染能誘導細胞產生氧化應激反應，影響DNA修復機制，導致基因表達模式發生變化。這種基因表達的異常會干擾對特定基因功能的研究，使得研究結果失真。

3. 蛋白質合成干擾
支原體污染可能改變細胞內蛋白質的合成與降解平衡，影響蛋白質的功能和細胞間的相互作用，進而影響實驗結果的可靠性。

4. 細胞凋亡增加
支原體感染可觸發細胞凋亡程序，導致細胞死亡。這不僅減少了可用于實驗的活細胞數量，還可能混淆對細胞存活和凋亡機制的理解。

5. 實驗結果的不可重復性
支原體污染導致的細胞生理狀態變化，使得實驗結果難以在不同實驗室或不同時間點重復，嚴重阻礙了科學研究的進展。

在實驗室的日常研究，為了確保科研工作順利進行，定期檢測細胞培養物是否存在支原體污染是很重要的。

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