DNA磁珠純化技術(shù)的原理與優(yōu)勢(shì)、操作細(xì)節(jié)
DNA磁珠純化技術(shù)的原理與優(yōu)勢(shì)、操作細(xì)節(jié)
—吉恩特生物實(shí)驗(yàn)室
1. 技術(shù)原理
DNA磁珠純化技術(shù)的核心原理是利用磁珠表面的官能團(tuán)（硅羥基、羧基、氨基等等）與DNA分子之間的靜電相互作用實(shí)現(xiàn)DNA的特異性吸附和洗脫。在特定條件下（如一定濃度的醇類，如：PEG600~2000等和鹽離子環(huán)境中），DNA分子的構(gòu)象會(huì)發(fā)生變化并暴露出大量帶負(fù)電荷的磷酸基團(tuán)，這些磷酸基團(tuán)與磁珠表面的官能團(tuán)（如羧基）在鹽離子的作用下形成“電橋”，從而實(shí)現(xiàn)DNA的特異性吸附。隨后通過(guò)改變?nèi)芤涵h(huán)境（如降低鹽離子濃度、加入洗脫緩沖液等）可以解除DNA與磁珠之間的相互作用并將DNA洗脫下來(lái)。原理總結(jié)：在高鹽、低pH值情況下吸附DNA；低鹽、高pH值情況下釋放DNA。
2. 技術(shù)優(yōu)勢(shì)
DNA磁珠純化技術(shù)相比傳統(tǒng)核酸純化方法具有顯著優(yōu)勢(shì)：
操作簡(jiǎn)便：步驟簡(jiǎn)單明了，易于掌握和操作，如手工操作，有磁力架或者磁鐵就可以完成。
自動(dòng)化程度高：手工實(shí)驗(yàn)流程可以模擬到自動(dòng)化儀器上，程序設(shè)置簡(jiǎn)單，減少人工操作誤差。
高通量：大量樣品能夠同時(shí)處理，如今市面上16通道~96通道儀器隨處可見(jiàn)，提高實(shí)驗(yàn)效率。
純度高：能夠有效去除雜質(zhì)和污染物，提高核酸純度。
3. 操作細(xì)節(jié)
樣本處理：非液體樣本處理要到位，該研磨需研磨。
磁珠轉(zhuǎn)移：轉(zhuǎn)移要干凈，不要有明顯的磁珠殘留，會(huì)影響DNA得率。
加熱洗脫：磁珠吸附DNA后，粘附團(tuán)聚實(shí)屬正常現(xiàn)象，可適當(dāng)加溫50℃洗脫.
—吉恩特生物實(shí)驗(yàn)室
1. 技術(shù)原理
DNA磁珠純化技術(shù)的核心原理是利用磁珠表面的官能團(tuán)（硅羥基、羧基、氨基等等）與DNA分子之間的靜電相互作用實(shí)現(xiàn)DNA的特異性吸附和洗脫。在特定條件下（如一定濃度的醇類，如：PEG600~2000等和鹽離子環(huán)境中），DNA分子的構(gòu)象會(huì)發(fā)生變化并暴露出大量帶負(fù)電荷的磷酸基團(tuán)，這些磷酸基團(tuán)與磁珠表面的官能團(tuán)（如羧基）在鹽離子的作用下形成“電橋”，從而實(shí)現(xiàn)DNA的特異性吸附。隨后通過(guò)改變?nèi)芤涵h(huán)境（如降低鹽離子濃度、加入洗脫緩沖液等）可以解除DNA與磁珠之間的相互作用并將DNA洗脫下來(lái)。原理總結(jié)：在高鹽、低pH值情況下吸附DNA；低鹽、高pH值情況下釋放DNA。
2. 技術(shù)優(yōu)勢(shì)
DNA磁珠純化技術(shù)相比傳統(tǒng)核酸純化方法具有顯著優(yōu)勢(shì)：
操作簡(jiǎn)便：步驟簡(jiǎn)單明了，易于掌握和操作，如手工操作，有磁力架或者磁鐵就可以完成。
自動(dòng)化程度高：手工實(shí)驗(yàn)流程可以模擬到自動(dòng)化儀器上，程序設(shè)置簡(jiǎn)單，減少人工操作誤差。
高通量：大量樣品能夠同時(shí)處理，如今市面上16通道~96通道儀器隨處可見(jiàn)，提高實(shí)驗(yàn)效率。
純度高：能夠有效去除雜質(zhì)和污染物，提高核酸純度。
3. 操作細(xì)節(jié)
樣本處理：非液體樣本處理要到位，該研磨需研磨。
磁珠轉(zhuǎn)移：轉(zhuǎn)移要干凈，不要有明顯的磁珠殘留，會(huì)影響DNA得率。
加熱洗脫：磁珠吸附DNA后，粘附團(tuán)聚實(shí)屬正常現(xiàn)象，可適當(dāng)加溫50℃洗脫.
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