α2-抗纖溶酶（α2-AP），亦稱(chēng)α2-纖溶酶抑制物（α2-PI），是Serpin蛋白家族的重要成員，主要通過(guò)與纖溶酶結(jié)合形成復(fù)合物發(fā)揮纖溶抑制作用。其缺乏可導(dǎo)致纖溶過(guò)度及出血傾向，而升高則與多種血栓性疾病相關(guān)。

α2-AP簡(jiǎn)介
α2-抗纖溶酶是一種分子量為63 kD的單鏈糖蛋白，其編碼基因SERPINF2位于17號(hào)染色體短臂（17p13），包含10個(gè)外顯子和9個(gè)內(nèi)含子。該蛋白主要由肝臟合成，血漿濃度約為1 µM（70 µg/mL），約為Glu-PLG濃度的1/3至1/2，是PAI-1濃度的1000倍以上。此外，α2-AP還存在于血小板的α顆粒中，可在血小板激活時(shí)分泌，并在腎臟和大腦中被檢測(cè)。

α2-AP在循環(huán)中以游離形式或與纖溶酶/纖溶酶原結(jié)合的形式存在，其半衰期（T½）約為2.6天。其N(xiāo)末端的谷氨酰胺殘基（Gln14）是與纖維蛋白交聯(lián)的結(jié)合位點(diǎn)，可在FXIIIa作用下與纖維蛋白α鏈C末端的賴(lài)氨酸殘基（Lys303）結(jié)合，從而保護(hù)纖維蛋白免于過(guò)早溶解。C末端的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）序列是纖溶酶/纖溶酶原的結(jié)合區(qū)域，而精氨酸殘基（Arg376）是纖溶酶原的切割位。

α2-AP分子的N末端和C末端可發(fā)生多種翻譯后修飾。根據(jù)N末端的不同，可分為兩種主要異構(gòu)體：Met-α2-AP（含464個(gè)氨基酸，N末端為蛋氨酸，約占30%）和Asn-α2-AP（含452個(gè)氨基酸，N末端為天冬酰胺，約占30%）。Met-α2-AP可在抗纖溶酶切割酶（APCE）和成纖維細(xì)胞激活蛋白（FAP）作用下轉(zhuǎn)化為Asn-α2-AP。Asn-α2-AP的抗纖溶活性更強(qiáng)，與纖維蛋白交聯(lián)的速度是Met-α2-AP的13。

α2-AP與纖溶酶的作用機(jī)制
1. α2-AP通過(guò)C末端的精氨酸殘基與纖溶酶的Kringle結(jié)構(gòu)域的精氨酸結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合，形成非共價(jià)復(fù)合物

2. 纖溶酶裂解α2-AP Met分子377-Arg376間的肽鍵，使其構(gòu)象發(fā)生變化，并形成穩(wěn)定的、共價(jià)結(jié)合的中間復(fù)合物PAP，其半衰期約為0.5。此外，α2-AP還可抑制中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶、胰蛋白酶和活化蛋白C的活。

α2-AP檢測(cè)原理與方法

免疫學(xué)檢測(cè)法
酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）可用于檢測(cè)血漿中游離總α2-AP。該方法首先利用生物素化的單克隆抗體識(shí)別并捕獲α2-AP的所有四種N端和/或C端修飾的異構(gòu)體，隨后使用辣根過(guò)氧化物酶（HRPO）標(biāo)記的多克隆抗α2-AP抗體進(jìn)行抗原捕獲并檢。此外，免疫比濁法和膠乳凝集法也可用于α2-AP的測(cè)。

功能測(cè)定法
1. 發(fā)色底物法
將含有α2-AP的患者血漿與過(guò)量纖溶酶共同孵育。纖溶酶被α2-AP迅速滅活，殘留的纖溶酶裂解發(fā)色底物，通過(guò)測(cè)量405 nm處的吸光度變化進(jìn)行定量分析。吸光度變化與α2-AP濃度呈反比關(guān)。

2. 微孔板發(fā)色底物法
將纖溶酶固定于微孔板上，加入待測(cè)樣本后，具有功能活性的α2-AP與纖溶酶結(jié)合并發(fā)生反應(yīng)。洗滌后加入抗α2-AP抗體，再使用辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的二抗。加入底物TMB后，記錄405 nm處的顏色變化。顏色變化程度與原始血漿樣本中α2-AP的活性呈正。

結(jié)果解讀

遺傳性α2-AP缺乏癥
遺傳性α2-AP缺乏癥是一種罕見(jiàn)的常染色體隱性遺傳病，最初被稱(chēng)為Miyasato病。純合缺陷患者的α2-AP濃度通常低于0.10 IU/mL，易發(fā)生嚴(yán)重出血或創(chuàng)傷后遲發(fā)性出血（如拔牙、手術(shù)后或皮膚黏膜出血），需與一期止血缺陷進(jìn)行鑒別。實(shí)驗(yàn)室檢查顯示，凝血酶原時(shí)間（PT）和活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）等常規(guī)凝血篩查結(jié)果正常，但血栓彈力圖（TEG）或旋轉(zhuǎn)血栓彈力圖（ROTEM）結(jié)果可能異。雜合缺陷者的α2-AP水平在0.30 - 0.60 IU/mL之間，通常無(wú)癥。

獲得性α2-AP缺乏
獲得性α2-AP缺乏可能見(jiàn)于肝臟疾病、淀粉樣變、急性白血病、彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）或纖溶治療期。

α2-AP升高
有研究證據(jù)表明，α2-AP含量升高與心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)增加或預(yù)后不良相關(guān)。α2-AP水平增高可導(dǎo)致靜脈血栓、肺栓塞、動(dòng)脈血栓和缺血性中風(fēng)。此外，α2-AP還可促進(jìn)微血管血栓形。糖尿病患者血漿中α2-AP水平增加，且與糖尿病晚期視網(wǎng)膜病變相關(guān)，尤其在女性患者中更為常。在肺動(dòng)脈高壓（PAH）患者中，循環(huán)α2-AP水平的顯著升高被認(rèn)為是其病理生理學(xué)的關(guān)鍵因素，與較差的預(yù)后和較高的死亡率相。此外，α2-AP還與阻塞性睡眠呼吸暫停（OSA）、心肌病、充血性心力衰竭和心房顫動(dòng)存在顯著關(guān)。

產(chǎn)品信息


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